显微镜着色剂黑白显微摄影的吸收特性
柯达雷登滤波器的吸收和传输特性,载于柯达照相滤波器手册 (公开号B-3),其中包括在不同波长的光谱数据的表格。 一个典型的可见光吸收光谱对这些滤波器,雷登号34a的1,示于图1。在这个图中,吸收(漫射密度)被绘制为波长为300〜700毫微米的函数。
该过滤器34a的有很强的吸收带在370纳米,在光谱的紫外区,而在可见光谱的绿色 - 黄色过渡区域的另一个中心在560纳米。 该过滤器通过或发送波长的漫射密度小于0.1,所以由图34A滤波器发送的波长范围是410至470纳米(蓝光)和660至700纳米(红色光)。
滤波器的传输带被方便地表示为条形图,如在图2中所示的暗区表示传送区域由超过10%的过滤器,和较亮区域代表波长阻断过滤器中的之一。 这种类型的曲线图提供了用于比较的一组过滤器,以快速地确定合适的滤波器,用于任何特定应用的简单索引。
条形图为共同柯达雷登彩色滤光片的汇编,列于表1。使用该表作为参考在选择过滤器,以提高使用黑白显微摄影染色标本的对比。
常见的生物着色剂吸收和传输特性发表在Sigma-Aldrich公司手册着色剂,染料,以及指标和HJ康涅狄格州的生物染色剂 ,其中包括数百染料的实际光谱数据。 用于红色(刚果红),绿(孔雀绿)和蓝色典型可见光吸收光谱(亚甲基蓝)的染料示于图1。在该图中,吸收(漫射密度)被绘制为波长从300到功能700纳米。
刚果红具有很强的吸收带在340毫微米的近紫外区和另一个在500纳米的蓝绿色的过渡区域附近。 该染料透过红色波长高于560纳米,因此,会出现红色的眼睛。 视觉上显示为绿色染料,孔雀绿具有很强的吸收带中心在600纳米的黄红色过渡区域附近,以400和550纳米之间的宽的传输频带(传递蓝色和绿色光)。 亚甲蓝具有很强的吸收带中心在660纳米,在可见光谱的红色区域,和低于600纳米的发射波长,赠与蓝色的染料。
当漫射密度(吸收)由染色超过0.1,所述波长带落下大于0.1被认为是吸收的区域内。 这可以方便地表示为条形图,如在图2中示出的那些的较暗区域表示吸收区域由超过0.1的漫射密度的染料,和较亮区域代表波长传递(不吸收)的染料。 这种类型的曲线图提供了用于比较的一组染料的快速确定合适的染料为任何特定染色应用了一个简单的索引。(奥林巴斯显微镜)
条形图为常见的生物着色剂的汇编,列于表1。使用该表作为参考在选择染料染色生物标本使用黑白胶片显微摄影。
常见的生物着色剂光谱吸收特性 | |||
污点 | 光谱吸收 | ||
酸性品红 |
530-560 |
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苯胺蓝 |
550-620 |
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天青B |
580+ |
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天青Ç |
580-640 |
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碱性品红 |
520-570 |
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灿烂甲酚蓝 |
550+ |
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胭脂红 |
500-570 |
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刚果红 |
400-560 |
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水晶紫 |
550-610 |
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达罗红 |
450-550 |
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曙红Y |
490-530 |
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赤藓红B |
510-540 |
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乙基曙红 |
530-550 |
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快绿 |
560+ |
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姬姆萨 |
500+ |
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浅绿色SF |
590+ |
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Luxol快速蓝色 |
500-640 |
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甲基绿 |
560+ |
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亚甲基蓝 |
590+ |
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中性红 |
480-570 |
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苯胺黑 |
450+ |
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核固红 |
460-550 |
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橙G |
450-510 |
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地衣红 |
500-620 |
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桃红B |
520+ |
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普鲁士蓝 |
560+ |
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派洛宁B |
510-560 |
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藏红花 |
350-480 |
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藏红 |
470-550 |
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苏丹IV |
470-580 |
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苏丹红 |
450-590 |
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柠檬黄 |
400-460 |
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甲苯胺蓝 |
560+ |
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台盼蓝 |
500+ |
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赖特 |
500+ |
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纳米 | 400 | 500 | 600 |
<紫外线红外线> |
表1