为什么蛋白MARKER少两条带?而且大分子量蛋白少而弱呢?

2016-11-28技术资料

为什么我的蛋白MARKER是4条带,而样品大分子量蛋白条带少呢??

右边(2孔)是MARKER啊,4条带呢,依次4.6.8.孔是样品(牛肉),浓度逐渐增大,大家觉得我这降解了?还是就是没提出来呢?? 为什么我的MARKER,少两条带呢??而且,大分子量蛋白,少儿弱呢???

牛肉全蛋白检测图
 

我也要做SDS-PAGE,还菜鸟一个呢。抱歉,没法回答楼主。关注中……

 

我前不久也出现了和你同样的问题,后来发现是我配制的30%的丙稀酰胺有问题,浓度配底了,当时没有达到30%,你也看看是不是这样,仅供参考!

 

请问你跑的分离胶的浓度时多少?还有确定marker没问题吗?换一个新的marker试试看~~~

 

如果本一条带变为多条带,可能是因为有些蛋白质分子没有充分还原,可增加样品中的巯基乙醇;或者发生聚集,可加入尿素,促进溶解;或者存在诸多蛋白质碎片,上样前可以离心。
蛋白质带丢失或过淡可能是在固定过程中未被变性,增加TCA浓度或者使用戊二醛固定。