荧光显微镜,常见问题疑难解答

2016-03-22技术资料

荧光显微镜下用相同条件的条件对细胞进行拍照,然后将得到的荧光照片用视频显微镜自带的软件进行选择,就软件就会读出选择位置的灰度值,这个就是荧光强度了,如果你的显微镜是进口四大品牌中的一个那肯定有这个功能。

很多软件也有这个功能比如IPP IPI  imageJ。
请注意几点:
1、条件一定要一致(ccd增益、曝光时间、激发光强度等等)
2、最好能有正负对照,正对照用于确定线性最高点,负对照用来扣除本底。
显微镜摄像头接口主要有三种:
USB2.0接口
USB3.0接口
1394接口(火线接口)
USB接口只有一条SUB数据线,那么它所传输的数据要进行处理就必须通过电脑来成,它需要占据电脑的一部分内存进行运算,再把运算结果传给显卡。
1394接口除了一条数据线外,它还需要一块1394卡,关键就在这块卡上,因为它代替了电脑的运算,提前在卡里面对数据进行处理之后才传给显卡。
请问不同倍数物镜下视野面积怎么计算?
答:标本的视场直径 = 目镜视场数 / 物镜倍率(单位:mm)( 注:视野面积依照πr2公式求之。)
以显微镜标示为10x/20的目镜为例,在10倍物镜下观察到的视野直径为:20/10=2mm; 视野面积=3.1416*(0.1)2=0.0314平方厘米。
按上述实验假设每视野平均之白血球数为4,则每毫升牛乳之中之白血球数应为:4*1/0.0314*100=2,000,000
用显微镜检查法对乳房炎进行诊断的实验中,采用白血球直接计数法,具体步骤为:取得混合均匀之牛乳0.01毫升,置清洁之玻片上,涂成一厘米见方之面积,自然干燥后,倾去染料,并以蒸馏水冲洗,等干后,置油镜下检查,记录视野之中白血球数。检查视野之多少,依所见白血球之数目而定。如在每一视野中均能见到多数细菌,则只检查数视野即足。若所见细菌很少,或完全见不到细菌,则必须检查50个以上之视野,然后计算出每毫升牛乳中之白血球数。
即将每一视野中之平均白血球数乘以每一视野面积之倒数,再乘以100,即得每毫升牛乳中白血球数。