荧光定量PCR在国际上哪些实验室做的好?

2016-09-06技术资料

荧光定量PCR在国际上哪些实验室做的好?想做这个方面 但是文献不知道下哪里的 主要做检测细胞因子mRNA表达这个方面!

 

想要了解realtime PCR?感觉可以找份realtime PCR仪的说明书来看看。


荧光定量PCR...就是我们常说的real time PCR或者qPCR,这已经完全是个常规技术了,还有世界上哪个实验室做的好这一问?随便找个说明书或者protocol,设计好引物,找好内参,提个RNA,反转录,把PCR体系配好,扔到仪器上run就行了。
 
 
不一般的引物设计

CR引物多半是不适用的,因为RPA引物比一般PCR引物长,通常需要达到30-38个碱基。引物过短会降低重组率,影响扩增速度和检测灵敏度。

在设计RPA引物时,变性温度不再是影响扩增引物的关键因素。RPA的引物和探针设计不像传统PCR那样成熟,用户需要自己摸条件进行优化。虽然还没有设计软件可以使用,不过TwistDxInc公司在自己的网站上提供了相应的筛选指南。

需要注意的是,目前的Twist Amp®扩增试剂盒都没提供RNase抑制剂。另外,受目前的生产方法所限,RPA反应不适合用于E.coli标准实验室菌株的扩增。